影片讲述了新生代蜘蛛侠迈尔斯（沙梅克·摩尔 Shameik Moore 配音）携手蜘蛛格温（海莉·斯坦菲尔德 Hailee Steinfeld 配音），穿越多元宇宙踏上更宏大的冒险征程的故事。面临每个蜘蛛侠都会失去至亲的宿命，迈尔斯誓言打破命运魔咒，找到属于自己的英雄之路。而这个决定和蜘蛛侠2099（奥斯卡·伊萨克 Oscar Is aac 配音）所领军的蜘蛛联盟产生了极大冲突，一场以一敌百的蜘蛛侠大内战即将拉响！
野泽雅子,堀川亮,鹤广美,草尾毅,田中真弓,佐藤正治,古川登志夫,渡边菜生子,皆口裕子,石冢运升,盐屋浩三,山寺宏一,森田成一,中尾隆圣,山路和弘,岸尾大辅,三木真一郎,乃村健次,伊藤美纪,中原茂
平川大辅,河原木志穗,冈岛妙,井本惠子,田中凉子,高桥智秋,永见遥,松本吉朗,亚城惠,栗林美奈实,古原奈奈,祭田绘理,神月葵,南波华月
浅沼晋太郎,齐藤壮马,中村悠一,石桥阳彩,江口拓也,加隈亚衣,山村响,梅原裕一郎
野上尤加奈,中村悠一,岛村侑,水岛大宙,早见沙织,堀江由衣,小野大辅,水桥香织,鹿野优以,伊藤静,浅野真澄,钉宫理惠,浅川悠,山口胜平
浅野真澄 , 甲斐田 裕子 , 真堂 圭 , 生天目仁美 , 茅原 実里 , 門脇 舞以 , 浅川 悠 , 武田 華 , 斎藤 千和 , 日野 聡 , 阪口周平 , 田辺留依 , 巽悠衣子 , 日笠陽子 , たかはし智秋 , 石川英郎
水桥研二,近藤好美,花村怜美,尾上绫华,水野理纱,寺崎裕香,中村祐子,岩崎征实,内藤玲,下崎纮史,平野贵裕,中川玲,井关佳子,井上优,加古临王,中村梨香,须加美纪,鲑延未可,新鹿由美子,斋藤由香子
